与此同时，新泻、长岡等地的战役也基本结束，西军（新政府军）的一只脚终于踏入了会津藩领的大门。

八月十七日，会津新撰组出阵于猪苗代城下，与大鸟圭介率领的传习第二大队及旧幕府军一同尝试夺回二本松城，但却以败退收场，反而让新政府军下定决心，在进入东北的严寒季节之前（和历的八月十七日为西历的十月初）发动会津总攻击。但前往会津本阵有多条路线，新政府军究竟会从哪一条路线入侵，便成了东军（同盟军）共同的研究课题。多次探讨之后会津藩将兵力分散至各条路线，重点在势至堂口和中山口进行了严防。因石筵口的母成峠是地势险峻的天险，敌人从此路线进攻的可能性极低，故只安排了以传习第二大队、会津、仙台等800人。

然而西军料定会津在石筵口的防御比较薄弱，于是佯装进攻白河口、势至堂口及日光口，真正的主力部队则是由板垣退助、伊地知正治率领的2600人直指石筵口的母成峠。会津藩虽依仗天险制作了炮台、关门等进行防御，但这个天险的缺陷就在于地势过于宽阔，需要现有士兵数倍的人数才能够克服。二十一日晨，西军正式向母成峠发动了攻击，当日天降浓雾，能见度极低，主力部队的传习第二大队又经过连日激战体力损耗严重，未能及时察觉敌人的入侵。双方兵力相差巨大，激战的结果是东军大败，新撰组中21名士官仅有2名存活，其他死伤者、下落不明者众多。阵亡者的枪支弹药、个人物品等也全部被西军没收成为战利品。

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